草甘膦本身的生物活性、杂草种类、施药环境、施药方法，都能影响草甘膦防除杂草的效果。
杂草
1.杂草因素
草甘膦是茎叶除草剂，除草效果与杂草的株高和叶龄有关。实践表明在杂草三至五叶一蕊时除草效果最好。因为此时杂草处于幼龄阶段，生长才开始发育，比较柔嫩，再加上根系还不发达抗逆性差，但恰又对除草剂敏感，所以除草效果好。过此阶段，杂草的抗逆性就逐渐增强，防除效果就下降。当然耐药性杂草效果更差。
土肥水条件好的地块
2.施药的士壤条件
实践中我们总结到土肥水条件好的地块杂草生长旺盛，茎叶组织柔嫩，对除草剂敏感，除草效果就突出。反之在士层浅薄或干旱的士壤中生长的杂草，因为本身的生长环境恶劣，在生长过程中形成了对恶劣环境的抗逆性，茎叶表面的角质层增厚，植株叶片气孔开张角度小，对除草剂的吸收性差，所以除草剂效果就差。
施药时的气温
3.施药时的气温
温度是影响草甘膦除草剂除草效果的最重要因素。草甘磷被杂草吸收后，温度愈高其分生组织传导药剂的速度就愈快，根茎中累积的药量就愈多，效果就愈明显。在极端低温气侯条件，施用的除草剂往往效果差。
施药时的空气湿度
4.施药时的空气湿度
在高湿的空气条件下喷施除草剂有利于杂草对除草剂的吸收。譬如，在杂草的旺盛期，雨晴初期时施用除草剂效果明显。原因之一就是空气的湿度较好。
5.光照对施用除草剂的影响
草甘磷除草剂对杂草的作用，主要是绿色的茎叶部位。所以叶绿素的光合作用是其作用点之一。一般情况在强光照射下，光合作用强烈，形成的光合作用产物就多，有利于除草剂的传导及活性发挥。
6.降雨影响草甘膦的除草效果
如果施完草甘膦除草剂以后，六小时内遇雨就要视情斟情补喷。因为降雨可以冲洗喷施在植株叶片上的药剂雾滴。
7.使用除草剂的方式方法
譬如草甘膦只能作茎叶处理剂，不作土壤处理剂。也就是说草甘膦的除草用药方式，只能是喷雾而不能用来拌士，作药士使用。且勾兑药剂时，不能用含泥质的水和硬度较高的井水。这些都是影响除草效果的重要原因。
8.施药时的风速及杂草上是否有露水
风速可以改变药滴的靶标方向，导致杂草不能受药，所以杂草不能死亡。另外，施药时杂草上的露水未干，能有效降低除草剂的施用浓度，故防治效果也差。
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